設置熒光分光光度計的狹縫要注意哪些事項
熒光分光光度計是用來掃描液相熒光標記物熒光光譜的儀器。它可以提供激發光譜、發射光譜、熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振度等物理參數。通過這些參數的確定,不僅可以進行般的定量分析,而且可以推斷分子在各種環境中的構象變化,從而闡明分子結構與功能的關系。熒光分光光度計的激發波長掃描范圍般為190~650nm,發射波長掃描范圍為200~800nm。它可用于液體和固體樣品的光譜掃描,如凝膠條。
許多因素,如溶液的厚度、熒光強度等,都與溶液的厚度、熒光強度等因素有關。然而,熒光強度的峰值位置很容易確定,可以用來確定什么樣的物質。熒光定量分析必須確定些條件。
狹縫的大小對熒光強度非常重要。狹縫的大小可以根據你測量的物質的熒光強度來調整。在相同濃度下,如果熒光強度過高,超過儀器的量程,可以減小狹縫。然而,需要指出的是,熒光強度不僅受狹縫尺寸的影響,還受分辨率的影響。對于熒光掃描,增加狹縫可以提高熒光強度和重現性,但分辨率會降低。分辨率由狹縫決定,當儀器其他結構固定時,分辨率由狹縫尺寸決定(光柵線數、焦距和綜合線性色散系數)。在實際應用中,狹縫尺寸應與測量峰的半峰寬相匹配。如果太大,峰會變形。它也決定了狹縫的大小。根據經驗值,如果狹縫擴大倍,光通量將增加4倍。